30064con

Labortary Research

如何挑选RT-PCR试剂盒?
作者:博日 工夫:2018-10-09 12:48:38 阅读数:824

金沙41668.com

RT-PCR是指将RNA 的反转录(RT)和cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的手艺。操纵逆转录酶将RNA逆转录(RT)成cDNA(Complementary DNA),再以cDNA 为模板,扩增分解目标片断。RT-PCR的常见使用包罗基因检测、转录物变异检测,以及克隆和测序用cDNA模板制备。

 

图1 

RT-PCR 分类

一步法和两步法是两种最常用的RT-PCR办法。

图2 一步法道理

图3 两步法道理

一步法 VS 两步法

一步法RT-PCR相比较两步法RT-PCR,可大大简化事情流程、低落成果差别、同时将净化可能性降至最低。一步法合用大量样本的处置,可应用于高通量。与一步法RT-PCR比拟,两步法RT-PCR的缺陷包罗多个步调耽误了事情流程、增长样本处置和操纵步调以及提高净化和成果变异的可能性。可是两步法能够获得大量的cDNA,同时可检测单个RNA样本中多个基因。

以下是博日一步法试剂盒引见


 

博日BioRT Master 逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)是博日(BIOER)专为以RNA模板在同一个反响系统中完成反转录和PCR而设想的,操纵简朴便利。同时反响历程中不需要分外开管,也无需增加试剂,大大的提高了检测的通量,同时将净化的可能性降至最低。

产物特性

1、一管式反响将净化躲避到最小


金沙41668.com

图4

2、接纳专利配方的AMV酶,具有超高的热不变,在高达60℃的反响温度可有用翻开RNA二级构造,能应对一般逆转录酶无法应对的庞大模板。

图5

操纵流程

30064con

尝试实例

1、1μg 鼠肝总RNA 别离用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法),I公司一步法RT-PCR试剂盒和P公司一步法RT-PCR试剂盒在50℃和55℃停止RT-PCR后电泳成果。

 

图6

2、1μg 鼠肝总RNA 别离用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)停止RT-PCR后电泳成果。

图7

 

以下是博日两步法试剂盒引见


 

博日BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(两步法)接纳美国先进技术消费的高质量逆转录酶(AMV酶)和长片断高保真的Taq mix DNA聚合酶。AMV逆转录酶具有较高的热稳定性,其反响温度可达60℃,能够逆转录具有庞大二级构造的RNA模板(见图5),可逆转录获得长达12kb的cDNA。长片断高保真的Taq mixDNA聚合酶具有高保真、高灵敏度、高延长速度等特性,可分解长达6kb的PCR产品。

 

产物特性

1、高保真、高产量、高灵敏度

2、多基因检测

3、可轻松应对庞大的二级构造RNA模板

4、使用方法烦琐灵敏,可获得大量cDNA,以便其他尝试利用


尝试实例

1μg 人类白介细胞总RNA用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(两步法)停止RT-PCR后电泳成果。

 

图8

在分离尝试的基础上,按照差别试剂盒的特性挑选试剂,常常事半功倍!

金沙41668.com

9159金沙部门联系关系产物

 

 

返回列表
30064con
用户隐私条目

尊敬用户个人隐私是杭州博日用户服务的一项根本政策。杭州博日不会在未经正当用户授权时向第三方公然或流露其注册资料及保留在杭州博日平台中的非公然内容,但以下状况除外: ⑴用户对本身信息保密不妥缘故原由,招致用户非公然信息保守; ⑵因为网络线路、黑客进犯、计算机病毒、当局管束等缘故原由形成的资料保守、丧失、被盗用或被窜改等; ⑶有关法令要求杭州博日官网服务管理要求供给用户的个人信息; ⑷在紧急情况下为保护用户和公家的生命、财富安全。

免责条目

杭州博日不包管本网站上任何内容的准确性、完整性和可靠性以及利用这些内容能够得出的任何成果。
杭州博日及相干人不能包管您任何时分都可进入、阅读和利用本网站;杭州博日对本网站和其内容的不能利用和利用毛病不负担任何义务。
本网站对其他网站的链接自己其实不暗示杭州博日承认或负担其他网站内容或利用上的义务。杭州博日以及相干人关于在进入、阅读和利用本网站、从本网站下载任何内容或经由过程本网站的任何链接进入其他网站而招致病毒或其他破坏性法式对您的电脑体系以及其他任何软件、硬件、IT体系或财富的损伤或丧失不负担任何义务。
杭州博日以及相干人关于第三人接纳不法手腕进入本网站获得有关暗码、资料和内容而惹起的任何间接及直接损伤或丧失不负担任何义务。终极注释权归杭州博日所有。

杭州博日保存随时改正、修正、更新本声明的权益。

利用条目

本网站由杭州博日有限公司(以下简称“杭州博日”)创设,本网站供给的任何内容(包罗但不限于笔墨、数据、图表、图像、声音或视频等)的版权均属于杭州博日或相干权益人。未经杭州博日或相干权益人事先的书面答应,您不得以任何方法私自复制、再造、传布、出书、转帖、改编或陈设本网站的内容。任何未经授权利用本网站的举动都将违背《中华人民共和国著作权法》和其他相干法律法规以及国际公约的划定,杭州博日充实保存追查响应法律责任的权益。

联系方式

地址:杭州市高新(滨江)区滨安路1192号(310053)

总机:0571-87774567